紫外可见分光光度计的测量原理

紫外可见分光光度计已经发展成为一种常规的检测仪器，分析原理是物质吸收紫外可见光能量，引起分子中电子能级的跃迁。紫外谱图的表示方法：相对吸收光能量A随吸收光波长的变化，从紫外吸收光谱图上我们可以获取到的信息有吸收峰的位置、强度和形状，提供分子中不同电子结构等信息。

提到紫外可见分光光度计，就不能不提到著名的朗伯-比尔定律。

朗伯-比尔定律是指当一束平行单色光通过均匀、非散射的稀溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比，光通过溶液时光学传播情况如下图所示。

其中，K为吸收系数，表征该物质吸光能力的大小；C为被测溶液浓度；L为光程，即比色皿长度。在某确定的波长处，被测溶液的吸光度与被测溶液的浓度成线性关系。朗伯比尔定律还具有加合性，即溶液对某一波长光的吸收等于溶液中各个组分对该波长光的吸收之和。

紫外可见分光光度计光路系统由脉冲氙灯光源，凹面光栅单色器，反射镜，狭缝等组成。脉冲氙灯具有瞬时发光强度大、光谱范围广、紫外光度强、无需预热等特点，为后面的检测快速提供可靠实用的光源信号。脉冲氙灯发出紫外光，经由步进电机带动的凹面光栅分光系统组成的单色器装置。经光栅色散分光后的光线，经过半透半反镜可以将光束一分为二，一束由出射狭缝射出，进入样品池，另一束作为参考光用于修正光源波动，整个过程同步实现了分光、检测和基线校正等功能。被吸收后的光信号经光电二极管转化成相应的电信号，经过AD转换后再通过无线数据传输传送到上位机进行实时显示、紫外光度计软件对其进行存储并处理。