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紫外光度计比色皿使用注意事项

 

为了建立紫外可见分光光度计准确比较的基础,对使用的比色皿的大小、形状比色皿的两块透光面的平行度、光路长度、光谱特性等都应该匹配(配对)。即使是同一批生产的同一规格的比色皿,其光路长度也不可能完全相等,透光面的透光特性、几何尺寸、透光面的平行度等都有可能有差异,,因此需要挑选配对使用。

比色皿几何尺寸的误差,会给测试工作的结果带来很大的误差。这个由比色皿引起的分析误差可以根据比耳定律计算出来。比耳定律A=εbC,设比色皿的光程(内部几何长度)b的误差为Δb,则A+ΔA=εC(b+Δb)=εbC+εCΔb。

因为一般比色皿的光程b为10mm,设其误差Δb为0.1mm,则根据式(3-6)可求出由比色皿的几何误差引起的测试吸光度误差为ΔA/A=Δb/b=0.1/10=0.01。即由比色皿的几何误差引起的测试吸光度误差为1%。

在此需要指出的是,在相对测量法中,比色皿的光程误差与配套误差是不可忽视的,不可随意调换参比比色皿与样品比色皿,因为相对测量中,是采取将未知浓度的样品与已知浓度的样品作比较的方法,即Cx=C样×Ax / A样;式中Cx———被测样品的未知浓度;C样———标准样品的已知浓度;Ax———被测样品的吸光度测量值;A样———标准样品的吸光度测量值。

特别是比色皿的配套误差,更应引起使用者们的高度重视。设比色皿的配套误差为ΔA,则上式将变成Cx=[(Ax+ΔA)/(A样+ΔA)]C样。此时,相对测量法比较依据的线性关系很可能因此遭到破坏。因此会带来很大的测试误差。

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