紫外光度计光谱带宽的重要性及测试方法

光谱带宽(Spectra band width———SBW)是影响紫外可见分光光度计定量分析误差的主要因素之一。

紫外光度计光谱带宽的重要性

首先，我们来看一下T.Owen的观点：T.Owen在研究光谱带宽对分析误差的影响后，他指出紫外可见分光光度计的光谱带宽非常重要。紫外可见分光光度计的光谱带宽(SBW)/自然带宽(NBW)≤0.1时(自然带宽即试样吸收带的半高度的宽度)，该仪器可满足99%的试样的分析，并且分析准确度可达99.5%。T.Owen给出了如下图所示的例子。

当用1nm光谱带宽测试时，可得出一个很漂亮的光谱图。仍是这台仪器、这个样品、同样的分析工笔者，当他分别改用5nm、10nm、20nm、50nm光谱带宽测试时得到的谱图，明显比用1nm光谱带宽测试的峰高低很多。在20nm光谱带宽测试时，两个很漂亮的峰就变成了一个马鞍形的峰。特别在50nm光谱带宽测试时，1nm光谱带宽测试时的两个峰就变成一个馒头峰。由此可见，光谱带宽对分析测试误差有多大的影响。但是，目前国内外广大分析工笔者还远没有认识到光谱带宽是紫外可见分光光度计分析误差的主要来源这个非常重要的问题。

光谱带宽的测试方法

目前，国际上对光谱带宽的测试方法一般是采用“谱线轮廓法”。主要是选用某些光源的特征谱线，对它进行光谱扫描，绘出该谱线的轮廓，再测出该谱线的半峰高的宽度即为光谱带宽。

用于光谱带宽的测试的光源一般为线光谱光源。并且，要求它在离被测的谱线附近20nm的范围内，最好没有其他谱线。一般紫外可见分光光度计的制造者在测试仪器的光谱带宽时，多选用Hg灯；因为它的546.1nm、253.7nm等特征线在其前后20nm以内，都没有其他谱线，是紫外可见分光光度计光谱带宽测试最好的光源。也有人选空心阴极灯作测试光源，但为数较少。

还有很多人在测试紫外可见分光光度计的光谱带宽时，采用氘灯的656.1nm或486.0nm这两根特征谱线。特别是656.1nm这根线，常被绝大多数科技工笔者使用。具体做法是：将仪器在660～470nm范围内扫描，求出656.1nm这根特征谱线的半宽度即是光谱带宽。

SBW是非常重要的技术指标，它直接影响分析测试的误差。虽说绝大部分样品的紫外可见吸收光谱的吸收峰不大尖锐，2nm的光谱带宽完全可满足分析测试要求，但有少部分样品，如青霉素钠、青霉素钾等的吸收峰很尖锐，不能用2nm的光谱带宽测试，否则，一些小的尖锐峰会消失，而大的尖锐峰的测量值会偏低，使分析测量误差增大。因此，一定要特别重视紫外可见分光光度计SBW对分析测试误差的影响。