光度准确度与光谱带宽有什么关系

光谱带宽是紫外分光光度计分析误差的主要来源之一，笔者将着重论述光度准确度与光谱带宽的关系

A.Owen在1988年指出：“吸光度测量的准确度，取决于仪器的SBW与试样的自然带宽(NBW)的比率。”(自然带宽被定义为最大吸收值的1/2处的吸收谱带宽度)。Knowles和A.Owen在大量实验的基础上指出：SBW/NBW≤0.1时，吸光度准确度可高达99.5%；如果SBW/NBW增大，则吸光度测量误差会增加。A.Owen还指出，NBW≥20时，2nm的SBW对于吸光度的准确测定是足够的，可满足大约99%的日常分析。这也是我国药典规定用于药检的紫外可见分光光度计的SBW一定要求≤2nm的主要原因。

测量光度准确度时，必须注意SBW的选择。具体理由是：

1. SBW小，则对应的狭缝宽度小，此时的杂散光也小，可提高吸光度测量的准确度。
2. SBW小，对同一自然带宽(NBW)来讲，波长准确度会高。因为不同的波长有不同的摩尔吸光系数，所以，波长准确度高时，Beer定律的偏离也会小，即光度准确度测试误差小。
3. SBW小，则对应的狭缝窄，但单色光的单色性也好，更能接近单色光，也可减少Beer定律的偏离，提高测量精度。

但必须注意，SBW不能太小，否则信号弱，仪器的信噪比小，灵敏度差。狭缝宽度是指紫外可见分光光度计狭缝的机械宽度。